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BUNSEN本生分享:96孔PCR板與封板膜的正確步驟有哪些
BUNSEN本生分享的96孔PCR板與封板膜操作,主要是通過規范流程實現密封,避免液體蒸發、交叉污染,保障PCR實驗結果穩定準確。
一、封膜前準備
耗材匹配確認?:選用BUNSEN適配的無RNase/DNase封板膜,確認膜型(光學壓敏膜/熱封膜)與96孔PCR板規格匹配。
環境與防護處理?:操作臺提前紫外消毒30分鐘,佩戴無粉手套,全程避免手指觸碰封板膜粘性面和PCR板孔口。
前置操作收尾?:確認96孔板所有孔位加樣完成,若使用熱封型封板膜,提前將熱封儀預熱至100~110℃。

二、封膜操作步驟
精準貼膜?
從自封袋取出單張封板膜后立即重新密封袋口,維持剩余膜的無酶環境。
底襯面朝上,沿切線緩慢撕下底襯露出粘性面,將粘性面一端對齊96孔板邊緣固定角度,緩慢向另一端平鋪拉平,避免貼歪、褶皺或產生氣泡。
均勻壓合密封?
優先使用專用壓膜板,無壓膜板可用邊緣光滑的銀行卡等硬質卡片替代。
沿水平方向刮壓2次、垂直方向刮壓2次,重點刮壓板的四周邊緣和孔與孔之間的縫隙,施力堅定不過度,防止孔內液體溢出。
若使用熱封型封板膜,將板放入預熱好的熱封儀中,100~110℃條件下熱壓3秒即可完成密封。
密封后強化處理?
封膜完成后將整板以500×g離心1分鐘,去除貼合產生的氣泡,提升密封效果和熒光檢測穩定性。
常溫靜置10分鐘,讓封板膜粘合力充分增強,避免后續上機出現翹邊。
三、質量檢查
目視檢查每個孔的周邊,確認封板膜與孔壁無間隙,有清晰均勻的貼合痕跡。
檢查板的四周邊緣,確保無遺漏的未密封區域,膜面平整無褶皺,膜表面無被擠出的孔內液體。
若發現褶皺、翹邊或密封間隙,需立即重新貼膜,不可勉強上機使用。
四、關鍵注意事項
全程避免反復揭開封板膜,防止水蒸氣進入孔內導致結果重復性變差。
熒光定量PCR實驗必須選用無自發熒光的光學級封板膜,避免干擾熒光信號檢測。
高溫長循環PCR實驗,建議選用適配高溫環境的專用膠粘劑封板膜,防止高溫下脫膠漏液。
型號推薦:
| BS-PCR-96-01-T | 0.1ml 96孔PCR板-無裙邊, 透明 |
| BS-PCR-96-01-W | 0.1ml 96孔PCR板-無裙邊, 乳白色 |
| BS-PCR-96-02-B-T | 0.2ml 96孔PCR板-半裙邊, 透明 |
| BS-PCR-96-02-T | 0.2ml 96孔PCR板-無裙邊, 透明 |
| BS-PCR-384W | 40μl 384孔全裙邊 PCR 板 乳白色 |
| BS-PCR-384T | 40μl 384孔全裙邊 PCR 板 透明 |
| BS480-PCR-01-B | Roche 480專用PCR 96孔板,0.1ml,乳白色 |
| BS-102301 | 0.1ml 96孔pcr板-半裙邊,透明,無酶,無熱源 (ABI專用) |
| BS-102201 | 0.1ml 96孔PCR板-半裙邊,自色,無酶,無熱源(羅民480專用) |
| BS-202203 | 0.2ml薄壁96孔可拆卸無裙邊PCR板+96聯光學平蓋 |
| BS-PCR-M | 熒光定量 qPCR 封板膜,高透光度壓敏封板膜 |
注:以上資料僅供參考,不作為實際數據,實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術老師。
本生BUNSEN科研耗材適應客戶:醫院檢驗科PCR實驗室,中心實驗室,肝病中心;第三方檢測機構,科研院所,大專院校,制藥廠,試劑生產廠家,疾控中心,檢驗檢疫。